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Technologie und Arbeitsablauf

Der MammaTyper® Test ist für die Verwendung in jedem molekularpathologischen Labor optimiert.

MammaTyper® basiert auf einer einstufigen RT-qPCR-Technik, bei der die reverse Transkription von mRNA und die anschließende quantitative PCR der resultierenden cDNA kombiniert sind. Die Signaldetektion erfolgt in Echtzeit mittels fluoreszenzmarkierter Hydrolysesonden. Die Expressionsergebnisse werden gegen zwei Referenzgene normalisiert. Darüber hinaus korrigiert ein Kalibrator Abweichungen zwischen Durchgängen und Instrumenten. Zusätzlich zu quantitativen und hoch reproduzierbaren Leistungsdaten liefert das Testkit dank gebrauchsfertiger Assaygemische schnelle und zuverlässige Ergebnisse. Das Kit wurde mit folgenden Echtzeit-PCR-Instrumenten validiert: Versant® kPCR Cycler, LightCycler® 480 Instrument II, cobas z 480 Analyzer und ABI 7500 Fast, Bio-Rad CFX96® und Mx3000P.

workflow

Das MammaTyper® Kit wurde zur Verwendung mit RNA entwickelt und validiert, die aus Formalin-fixierten und in Paraffin eingebetteten (FFPE) Brustkrebs-Gewebeproben mittels des RNXtract® RNA-Extraktionskits gemäß der Gebrauchsinformation des Herstellers extrahiert und aufgereinigt wurde. Eluate des RNXtract® Kits können im MammaTyper® Test direkt eingesetzt werden.

Dank des schnellen und leicht handhabbaren RT-qPCR-Protokolls können quantitative Daten zur relativen Genexpression der vier Biomarker an einem einzigen Tag erhalten werden. Mit MammaTyper® erhaltene Ergebnisse weisen eine hohe Präzision und eine hohe Reproduzierbarkeit innerhalb und zwischen Läufen auf. Während der technischen Validierung des Tests zeigte sich eine sehr geringe Schwankung zwischen Prüfzentren.

Daher ermöglicht MammaTyper® eine präzise Bestimmung des Brustkrebssubtyps einer Patientin, den Schlüssel für Therapieentscheidung und Prognose.

ABI 7500 Fast ist eine eingetragene Marke von Applied Biosystems.
Versant ist eine eingetragene Marke von Siemens Healthcare Diagnostics GmbH.
LightCycler 480 instrument II und cobas z 480 Analyzer eingetragene Marken von Roche Diagnostics GmbH.